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May 31, 2023

Desenvolvimento do circuito ambiental

Parasitas & Vetores

Parasites & Vectors volume 16, Número do artigo: 78 (2023) Citar este artigo

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As mudanças globais estão remodelando a distribuição de doenças transmitidas por vetores, espalhando vetores para áreas anteriormente não endêmicas. Desde 2013, a esquistossomose urogenital surgiu na Córsega e ameaça os países europeus. Os vetores gastrópodes liberam larvas de esquistossoma que podem infectar humanos que entram em contato com corpos de água doce. O monitoramento dos vetores hospedeiros da esquistossomose é um pré-requisito para entender e, posteriormente, controlar a transmissão desse patógeno. Como as pesquisas malacológicas são demoradas e requerem conhecimento especial, o uso de um método molecular simples é desejável.

O objetivo deste estudo é desenvolver um protocolo pronto para uso usando o método LAMP (loop-mediated isothermal amplification) para detectar DNA ambiental de Bulinus truncatus, vetor de Schistosoma haematobium. Curiosamente, o método LAMP possui todas as características necessárias para adaptabilidade às condições de campo, principalmente em países de baixa renda: velocidade, simplicidade, reagentes liofilizados, baixo custo e robustez contra inibidores de amplificação de DNA. Testámos este novo método em amostras de água da Córsega previamente analisadas por qPCR e ddPCR.

Demonstramos que nossa ferramenta de diagnóstico B. truncatus eLAMP (Bt-eLAMP) pode detectar o eDNA de Bulinus truncatus de forma tão eficaz quanto os outros dois métodos. O Bt-eLAMP pode detectar até 1/4 das amostras positivas não detectáveis ​​por qPCR. Além disso, o protocolo Bt-eLAMP completo (amostragem, pré-processamento da amostra, amplificação e revelação) não requer equipamentos sofisticados e pode ser feito em 1 hora e meia.

A detecção LAMP de DNA ambiental fornece vigilância sensível em larga escala da esquistossomose urogenital, possível através da identificação de áreas potencialmente ameaçadas. De forma mais geral, o método eLAMP tem grande potencial em doenças transmitidas por vetores e ecologia.

Está bem estabelecido que as mudanças globais aumentam o risco de surtos de doenças infecciosas [1,2,3]. As sucessivas ondas epidêmicas na última década, como a pandemia de gripe suína, numerosos surtos do vírus Ebola na África Ocidental, o surto do vírus Zika em 2015 e a pandemia de COVID-19 resultaram em mortalidade e morbidade significativas, espalhando-se por vários países [2]. As incidências de doenças transmitidas por vetores em humanos e animais são afetadas pelas mudanças climáticas e pelo estilo de vida humano (por exemplo, migração, poluição, urbanização) [1, 4, 5]. Por vários anos, muitos deles surgiram ou ressurgiram em todo o mundo. Por exemplo, a distribuição geográfica do vírus da encefalite transmitida por carrapatos e a incidência humana estão aumentando em toda a Europa, incluindo a França, em áreas que antes não eram endêmicas [6]. Embora a esquistossomose seja uma doença ligada à pobreza e à falta de água potável nas famílias, a infecção esquistossomótica foi identificada no sul da Europa (França e Espanha) [7, 8]. Os vetores gastrópodes liberam larvas de esquistossoma que podem infectar humanos que entram em contato com corpos de água doce. No verão de 2013, > 106 casos foram diagnosticados na Córsega, uma ilha mediterrânea francesa conhecida por sua atratividade turística [9, 10]. Desde então, alguns casos de transmissão autóctone têm persistido ano após ano [11]. Para muitas doenças parasitárias, mudanças globais levam a uma redistribuição espacial dos vetores ou dos hospedeiros intermediários que transmitem as doenças e também podem levar ao surgimento de doenças [12,13,14,15,16]. Mapear áreas de surto de doenças infecciosas é essencial para identificar populações em risco de infecção e comunicar e alertar o público [17]. Com relação às doenças transmitidas por vetores, como a transmissão é dependente da presença dos vetores, o mapeamento de suas distribuições espaciais é necessário para o controle das doenças. Foi demonstrado em vários países africanos que as campanhas de controle de caracóis desempenham um papel importante no controle de doenças transmitidas por caracóis (SBDs) e que a aplicação regular de moluscicidas provavelmente contribui para a eliminação de SBDs em áreas de risco [18,19,20 ]. No entanto, o monitoramento de SBDs, particularmente aqueles transmitidos por espécies de caramujos de água doce, é menos óbvio. A heterogeneidade espacial e temporal da distribuição dos moluscos de água doce explica a dificuldade de estabelecer esses mapas de risco [21, 22]. Os métodos convencionais de amostragem são, portanto, trabalhosos e demorados, e exigem malacologistas para identificação taxonômica, que se tornaram cada vez mais escassos nos últimos anos, à medida que a biologia molecular decolou. Portanto, atualmente é muito difícil monitorar populações de caracóis em grande escala espacial e temporal [21, 22].